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土壤基因组DNA提取试剂盒说明书

产品信息

产品简介

本试剂盒适合于从褐土、淤泥、火山灰等各种极端土壤环境中提取微生物DNA。对土壤中各种细菌、真菌有很好裂解效果，最大限度的保留了微生物 DNA 的多态性。

本试剂盒采用我公司特有的腐殖质吸附材料，可高效专一的去除各种腐殖质成分而丝毫不会影响 DNA  的产率，纯度较酚、氯仿抽提法提高数倍。

使用本试剂盒提取的 DNA  产量大、完整性好，可直接用于各种常规操作，包括酶切、PCR  、文库构建、Southern  杂交等实验。

产品内容

使用方法

使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为 使用台式离心机在室温下离心。

1、称取土壤样本 0.1-0.5g，在液氮中充分研磨成细粉末，加入 450ul  溶液 A  震 荡混匀。

（也可直接称取样本 0.1-0.5g  于离心管(建议使用 2ml   圆底管)，加入 450ul  溶 液 A  剧烈震荡混匀 1-2min  至没有固体块。 使用液氮研磨效果最佳。）

2、加入 50ul  溶液 B  充分颠倒混匀 (不要剧烈震荡)，65℃水浴 6min，每 2min充分颠倒混匀一次。

3、加入 100ul  溶液 C  充分颠倒混匀 (不要剧烈震荡)，12000rpm  离心 10min  。

4 、将上清转移到新的离心管，12000rpm  离心 2min  。

5 、在吸附柱中加入 200ul  溶液 D   ，将离心后的上清加入到带有溶液 D  的吸 附柱中，用移液器吹吸几次混匀，12000rpm  离心 1min。

6 、将收集管中的滤出液混匀后重新吸入吸附柱(  必须) ，12000rpm  离心 1min。

7、倒掉收集管中的废液，在吸附柱中加入漂洗液 500ul ，12000rpm  离心 1min。

8 、倒掉收集管中的废液，重复步骤 7  两次(共漂洗三次)。

9 、倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管，12000rpm  离心 2min  。

10 、拿出吸附柱在室温干燥数分钟(  因季节及气候等因素不等) ，或 50℃干燥1min。

11 、将吸附柱放入一个新的离心管中，加入 50- 100ul  洗脱液(65 ℃预热)， 12000rpm  离心 1min。

12 、将离心管中的液体重新加入到吸附柱中，12000rpm  离心 1min 。离心管中 即为土壤微生物 DNA  溶液。

13、若产物 PCR  效果差，可以适当稀释 DNA  产物，或添加 1/10  体积的 PCR增强剂。

注意事项

1 、新鲜的土壤样本会得到更高的产率，不同样本在采样前应先查阅相应的最 佳保存条件。

2 、若溶液中出现浑浊可在 37℃水浴中溶解片刻至清澈，不会影响结果。

3 、在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀，否则会堵塞吸附柱，并影响 产物纯度。

4 、洗脱缓冲液的体积最好不少于 50ul  ，体积过小会影响回收效率；建议使 用试剂盒附带的洗脱缓冲液，用水洗脱也会损失部分产物；DNA 应保存在-20 ℃ 避免反复冻融，以防降解。

5 、若产物含有腐殖质残余则会严重影响 DNA  的光吸收值，应采取电泳检测 和分光光度计检测相结合的方式鉴定。

6 、液体试剂避免接触皮肤，若意外接触应立即使用大量清水冲洗。

保存条件

按照产品内容保存，1 年有效；

1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

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