产品简介：
CTAB（hexadecyItrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵），是一种阳离子去污剂， 具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中（0.7mol/L NaCl）， CTAB 与蛋白质和多聚糖形成复合物，只是不能沉淀核酸。通过有机溶剂抽提，去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。
Beijing CHEJETER Technology Co.,Ltd.
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2×CTAB提取液（无菌）
说明书
产品信息
| 产品名称 | 产品货号 | 规格 | ||
2×CTAB提取液（无菌） | CT1001 | 500mL | ||
产品简介：
CTAB（hexadecyItrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵），是一种阳离子去污剂， 具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中（0.7mol/L NaCl）， CTAB 与蛋白质和多聚糖形成复合物，只是不能沉淀核酸。通过有机溶剂抽提，去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。
使用方法（仅供参考）：
一、试剂准备：
1.氯仿-异戊醇混合液（24:l）。96mL氯仿加4mL异戊醇混匀。
2.65℃预热CTAB溶液后将1mL还原剂（货号：M8210）加入CTAB溶液中（按照500:1体积比混合， 建议按需配制，请勿多配）。
二、操作步骤（仅供参考）：
1.液氮研磨 0.1g 左右植物组织，转移到 1.5mL 离心管中，加入 700uL 2×CTAB 提取液（已加入还原剂）。或者液氮研磨之后，在研钵中加入 700uL 2×CTAB 提取液，然后吸取到 1.5mL 的离心管中
（建议总体积不要超过 1mL）。
2.将离心管置于 65℃水浴 30min-1h，期间每隔 10min 左右轻轻晃动离心管。
3.水浴完成后冷却2min，加入0.5mL的氯仿-异戊醇混合液，剧烈震荡混匀。10000-12000 rpm离心5-10min。
4.取上步离心管中上清液到新的离心管中。
注意：上步离心后应该会分三层：上层为水相，中间为蛋白和植物碎片，下层为有机相。吸取时避免触及蛋白和有机相。如不小心吸取到中下层，或者中间层较厚，建议少吸取水相，或吸取之后再加入500uL氯仿-异戊醇混合液，重新混匀离心取上清。
5.在上清中加入等体积的异丙醇，颠倒混匀。（或加入2倍体积的无水乙醇和1/10体积的3M pH5.2
的乙酸钠）。置于-20°C沉淀30min以上，12000rpm离心l0min，弃上清。
6.沉淀用75%乙醇洗涤1次，12000rmp离心3-5 min，弃上清，沉淀自然干燥后溶于50uL去离子水或者TE缓冲液中，加入1uL RNase（20ug/mL），37℃温育30 min。
7.置于-20℃保存。
备选方案：
1.可以加入适量PVP去除多糖多酚污染。PVP（聚乙烯毗咯烷酮）是酚的络合物，能与多酚形成一种不溶的络合物质，有效去除多酚，减少DNA中酚的污染；同时它也能和多糖结合，有效去除多糖。
2.可以在加入CTAB提取液之后震荡混匀，5000rmp离心2min取上清，沉淀为未研磨充分的碎片或者不溶物。然后在上清中加入氯仿-异戊醇混合液纯化，可以有效去除未裂解的植物碎片。
3.可以在加氯仿-异戊醇混合液之前，加入Tris饱和酚（pH>7.8）-氯仿混合液震荡离心取上清后， 再用氯仿-异戊醇混合液纯化，可以有效去除蛋白污染。
常见问题分析：
问题 | 原因 | 对策 |
DNA样品不纯，抑制后续酶解和PCR反应 | DNA中含有蛋白、多糖、多酚类杂质 | 重新纯化DNA，去除蛋白、多糖、多酚等杂质（具体方法见前）。 |
DNA在溶解前，有酒精残留， 酒精抑制后续酶解反应 | 重新沉淀DNA，让酒精充分挥发。 | |
DNA中残留有金属离子 | 增加70%乙醇洗涤的次数（2-3次）。 | |
DNA降解，DNA提取量少 | 实验材料不佳或量少 | 尽量选用新鲜（幼嫩）的材料。 |
破壁或裂解不充分 | 动植物要匀浆研磨充分；G+菌、酵母裂解前先用生物酶或机械方式破壁； 高温裂解时，时间适当延长（对于动 物细胞、细菌可增加裂解液的用量）。 | |
沉淀不完全 | 低温沉淀，延长沉淀时间；加辅助物， 促进沉淀。 | |
洗涤时DNA丢失 | 洗涤时，最好用枪头将洗涤液吸出， 勿倾倒。 |
注意事项：该试剂低温放置易析出，需50℃预热震荡30min左右可正常溶解使用。
保存条件
常温运输保存， 有效期2年。
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿
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