Beijing CHEJETER Technology Co.,Ltd.

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植物基因组DNA提取试剂盒说明书

产品信息

产品简介

本试剂盒采用可以特异性结合 DNA  的离心吸附柱和独特的缓冲液系统提取植物的基因组 DNA 。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料， 能够高效、专一吸附 DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。 提取的基因组 DNA  片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的植  物基因组 DNA 可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern  杂交等实验。

产品内容

使用方法

使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。 所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1、植物组织预处理：取新鲜植物组织（不超过 100mg）或干重组织（不超过 20mg），于液氮中充分研磨至细粉状，让液氮自然挥发。

2、将研磨好的植物组织粉末迅速转移到预先装有 400ul  溶液 PA、20ul RNase A（10mg/ml）和 5ul β-巯基乙醇的离心管中，充分颠倒混匀，室温放置 10min。

3 、加入 140ul  溶液 PB ，充分颠倒混匀，12000rpm  离心 10min ，将上清转移至新离心管中(约 400-500ul) ，注意不要吸入沉淀。

4 、加入和上清相同体积的溶液 PC ，充分颠倒混匀，再加入和溶液 PC  相同体积的无水乙醇 ，此时若出现絮状物 ，将絮状物吹散后一起加入吸附柱中，12000rpm  离心 5min ，弃废液，一次加不完可分两次加入。

注意：如果吸附柱膜呈绿色或离心时有堵塞现象，可向吸附柱中加入 600ul  无水乙醇，并适当延长离心时间。

5 、向吸附柱中加入 600ul  漂洗液(请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm  离心 1min ，弃废液，将吸附柱放回收集管。

6 、向吸附柱中加入 600ul  漂洗液，12000rpm  离心 1min ，弃废液，将吸附柱放回收集管中， 12000rpm  离心 2min。

7、将吸附柱置于室温或 50℃温箱放置数分钟，否则残余的乙醇可能会影响后续的实验如酶切、PCR  等。

8 、将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加 50-200ul  经65℃水浴预热的洗脱液，室温放置 1-5min ，12000rpm  离心 2min ，即可得到高质量的植物基因组 DNA。

9、(可选)离心所得洗脱液再加入吸附柱中，室温放置 2min，12000rpm  离心 2min。

注意事项

1 、组织应尽量选取新鲜幼嫩样本，富含多糖多酚的组织可能会提取失败，请选用多糖多酚专用试剂盒。

2 、如果试剂盒中的试剂出现沉淀，可在 65℃水浴中融化，不影响使用。

3 、洗脱缓冲液的体积不能小于 50ul ，DNA  产物应-20℃保存。

保存条件

室温(15℃-25℃)  干燥保存，1 年有效；2℃-8℃保存时间更长。

1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

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