产品介绍
改进的异硫氰酸胍/酚一步法裂解细胞和灭活 RNA 酶，然后总 RNA 在高盐状态下选择吸附于离心株内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤，去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的 RNase free H2O 将纯净 RNA 从硅基质膜上洗脱。
产品特色
1.基因组残留少：一步去除 gDNA 污染
2.RNA 纯度高：获得的 RNA 可直接用于下游纯度要求高的实验
3.适用性广：兼容各种细胞、组织样本
保存条件
本产品收到后按照上面指示温度存放各成份，储存 12 个月不影响使用效果。裂解液 RL 可以常温运输，收到后 4℃避光保存。
注意事项
1. 第一次使用前请先在漂洗液 RW 瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入！
2. 为防止 RNA 降解，所有离心步骤如未加说明，均在 4℃低温进行。
3. 检测 OD260/OD280 吸光度比值时，RNA 样品应该溶于 TE 后检测，如果用水稀释后检测，由于一般水离子强度和 PH 值低，会使 OD280 升高，从而使比值降低。
4. 操作实验时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。
保存条件
本产品收到后按照上面指示温度存放各成份，储存 12 个月不影响使用效果。裂解液 RL 可以常温运输， 收到后 4℃避光保存。
Beijing CHEJETER Technology Co.,Ltd.
Tel:010-82700004
Wed:www.cjt-bio.com
E-mail:finance@cjt-bio.com
细胞/组织 RNA 柱式提取试剂盒（50rxns）
AR Tissue/Cell Total RNA Isolation Kit (50rxns)
产品信息
| 产品名称 | 产品货号 | 规格 | ||
| 细胞/组织RNA柱式提取试剂盒 | HT25010 | 50T | ||
组分名称 | 保存 | 规格 |
裂解液 RL | 4℃避光 | 50mL |
去蛋白液 RE | 室温 | 45mL |
漂洗液 RW | 室温 | 10mL |
RNase-free ddH2O | 室温 | 10mL |
RNase-free 吸附柱 RA | 室温 | 50 个 |
收集管(2mL) | 室温 | 50 个 |
RNase-free 离心管 (1.5 ml) | 室温 | 50 个 |
产品介绍
改进的异硫氰酸胍/酚一步法裂解细胞和灭活 RNA 酶，然后总 RNA 在高盐状态下选择吸附于离心株 内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤，去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除， 最后低盐的 RNase free H2O 将纯净 RNA 从硅基质膜上洗脱。
产品特色
基因组残留少：一步去除 gDNA 污染
RNA 纯度高：获得的 RNA 可直接用于下游纯度要求高的实验
适用性广： 兼容各种细胞、组织样本
操作步骤
1. 自备材料： 氯仿、无水乙醇、RNase-free 枪头等。
2. 首次使用试剂盒前， 在漂洗液 RW 中加入 70 ml 无水乙醇，并进行标注。
样本处理
1) 动物组织
a. 匀浆处理： 取新鲜组织， 每 50- 100 mg 加入 1mL 的裂解液 RL 后用玻璃匀浆器或者电动匀浆 器进行匀浆，直至无明显组织块即可。AR Tissue/Cell Total RNA Isolation Kit (50rxns)
【注】：冰上进行匀浆， 防止局部温度瞬时升高导致 RNA 降解。
b. 液氮研磨： 将液氮研磨好的粉末立即转移到裂解液 RL 中，按每 50- 100 mg 加入 1mL 裂解液 RL，涡旋震荡直至无明显粉末团即可。
【注】：匀浆完或者液氮研磨后的样本，若不立即提取，可置于-80℃保存 2) 培养细胞
a. 贴壁细胞：不需消化，吸除细胞培养基上清后可直接在培养皿中立即使用 RL 进行消化、裂解； 或用胰酶消化后离心收集细胞加入 RL ，每<5 × 106 个细胞加入 500 μl 的 RL ，涡旋震荡直至 无明显细胞团即可。
b. 悬浮细胞：直接离心收集细胞，加入 RL ，每<5 × 106 个细胞加入 500 μl 的 RL ，涡旋震荡直 至无明显细胞团即可。
【注】：细胞裂解后的样本，若不立即提取，可置于-80℃保存
RNA 提取
以下过程均在无 RNase 污染的环境中进行
1) 将匀浆样品剧烈震荡混匀，在 15-30℃条件下孵育 5 min 以使核蛋白体完全分解。
2) 每 1 mL RL 加 0.2 mL 氯仿。盖紧样品管盖，剧烈振荡 15 sec 并将其在室温下孵育 3 min。
3) 于 4℃ 12,000 rpm 离心 10 min ，样品会分成三层：下层有机相，中间相和上层无色的水相， RNA 存在于水相中。水相层的容量大约为所加 RL 体积的 60%，把水相转移到新管中， 进行 下一步操作。
4) 加入 1 倍体积 70％乙醇（请先检查是否已加入无水乙醇!），颠倒混匀（此时可能会出现沉淀）。得到的溶液和可能沉淀一起转入吸附柱 RA 中（吸附柱套在收集管内）。
5) 12,000 rpm 离心 45 sec，弃掉废液， 将吸附柱重新套回收集管。
6) 加 400 μl 去蛋白液 RE ，12,000 rpm 离心 45 sec ，弃掉废液。
7) 加入 500 μl 漂洗液 RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000 rpm 离心 45sec，弃掉废液。
8) 加入 500 μl 漂洗液 RW ，12,000 rpm 离心 45 sec ，弃掉废液。
9) 将吸附柱 RA 放回空收集管中， 12,000 rpm 离心 2 min，尽量除去漂洗液， 以免漂洗液中残留 乙醇抑制下游反应。
10) 取出吸附柱 RA ，放入一个 RNase free 离心管中，根据预期 RNA 产量往吸附膜的中间部位 加 50-80 μl RNase free H2O（事先在 65℃水浴中加热效果更好），室温放置 2 min ，12,000 rpm 离心 1 min。如果需要较多 RNA，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，离心 1 min。
注意事项
1. 第一次使用前请先在漂洗液 RW 瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇， 以免 多次加入！
2. 为防止 RNA 降解，所有离心步骤如未加说明，均在 4℃低温进行。
3. 检测 OD260/OD280 吸光度比值时， RNA 样品应该溶于 TE 后检测，如果用水稀释后检测， 由于 一般水离子强度和 PH 值低，会使 OD280 升高， 从而使比值降低。
4. 操作实验时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
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奖励详情：请联系区域销售经理
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