产品介绍
本试剂盒用于检测细胞凋亡早期的发生，其中 Annexin V 为胞内蛋白膜联蛋白家族成员， 以钙离子依赖的方式选择性与磷脂酰丝氨酸(PS)结合。
PS 正常分布在细胞膜内侧，即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期，不同类型 的细胞都会把 PS 外翻到细胞膜外侧。用带有 FITC 标记的 Annexin V，即 Annexin V-FITC， 就可以通过流式细胞仪或荧光显微镜检测到 PS 外翻这一细胞凋亡的重要特征。
碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种可对 DNA 染色的细胞核染色试剂，在嵌入 DNA 后释放红色荧光。PI 不能穿透完整的细胞膜，但可以穿透坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完 整性的细胞。因此，将 Annexin V 与 PI 联合使用时，PI 被排除在活细胞（Annexin V-/PI-） 和早期凋亡细胞（Annexin V+/PI-）外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被 FITC 和 PI 结合 染色呈现双阳性（Annexin V+/PI+）。
FITC 最大吸收波长为 490nm，激发波长为 525nm，PI-DNA 复合物的最大吸收和发射波 长分别为 535nm 和 615nm。
注意事项
1、可立式离心管内试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2、Annexin V-FITC 和碘化丙啶（PI）是光敏物质，在保存与操作时请注意避光。
3、在细胞洗涤的最后一步，请尽量将上清弃净，以免 PBS 残留影响实验结果。
4、为获得准确试验结果，建议样品在染色后 1 小时内进行分析。
保存条件
2-8℃避光保存，一年有效。Annexin V-FITC 不可冷冻。
Beijing CHEJETER Technology Co.,Ltd.
Tel:010-82700004
Wed:www.cjt-bio.com
E-mail:finance@cjt-bio.com
Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
产品信息
| 产品名称 | 产品货号 | 规格 | |||
| Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒 | ZD27010 | 50T | |||
| ZD27010 | 100T | ||||
产品简介
本试剂盒用于检测细胞凋亡早期的发生，其中 Annexin V 为胞内蛋白膜联蛋白家族成员， 以钙离子依赖的方式选择性与磷脂酰丝氨酸(PS)结合。
PS 正常分布在细胞膜内侧，即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期，不同类型 的细胞都会把 PS 外翻到细胞膜外侧。用带有 FITC 标记的 Annexin V ，即 Annexin V-FITC ， 就可以通过流式细胞仪或荧光显微镜检测到 PS 外翻这一细胞凋亡的重要特征。
碘化丙啶 (Propidium Iodide, PI) 是一种可对 DNA 染色的细胞核染色试剂，在嵌入 DNA 后释放红色荧光。PI 不能穿透完整的细胞膜，但可以穿透坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完 整性的细胞。因此，将 Annexin V 与 PI 联合使用时，PI 被排除在活细胞 (Annexin V-/PI- ) 和早期凋亡细胞 (Annexin V+/PI- ) 外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被 FITC 和 PI 结合 染色呈现双阳性 (Annexin V+/PI+)。
FITC 最大吸收波长为 490nm ，激发波长为 525nm ，PI-DNA 复合物的最大吸收和发射波 长分别为 535nm 和 615nm。
产品内容
| Component | 50T | 100T | |
| Annexin V-FITC Propidium iodide Binding Buffer( 10×) | 250 μl 500 μl 25 ml | 500 μl 1 ml 50 ml | |
使用方法
1. 样品染色
1) 将 Binding Buffer (10×) 稀释成 1×Binding buffer 工作液备用 (1ml Binding Buffer (10×) 需加入 9ml 无菌去离子水) 。
2) 对于悬浮细胞，500- 1000g 离心 5min 收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含 EDTA 的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在 轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管 内，500- 1000g 离心 5min 收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷 PBS 溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两 次。
4) 在细胞沉淀中加入 1×Binding buffer 工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到 1×106 cell/ml。
5) 吸取 100μl 细胞悬液 (细胞总数为 1×105 cell) 至一新管中，加入 5μl Annexin V-FITC 和 5- 10 μl PI ，轻轻混匀，室温避光孵育 15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入 400μl 1×Binding Buffer 工作液，混匀后使用流式细胞仪检测 (1 小时 内检测) 。
建议设置正常细胞、PI 单染和 Annexin V-FITC 单染 3 个对照组，正常细胞组可作为荧光补 偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。若十字门的位置不易设定，可采用经凋亡诱导的细 胞进行设定。结果可用 CellQuest 等软件进行分析，绘制双色散点图 (two-color dot plot) ， FITC 为横坐标，PI 为纵坐标。Annexin V-FITC 和 PI 联合使用时，活细胞仅有很低强度的背 景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察 FITC 和 PI。 被 Annexin V-FITC 结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显 示红色，膜上有绿色光环。
注意事项
1 、可立式离心管内试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体 洒落。
2 、Annexin V-FITC 和碘化丙啶 (PI) 是光敏物质，在保存与操作时请注意避光。
3 、在细胞洗涤的最后一步，请尽量将上清弃净，以免 PBS 残留影响实验结果。
4 、为获得准确试验结果，建议样品在染色后 1 小时内进行分析。
保存条件：
2-8℃避光保存，一年有效。Annexin V-FITC 不可冷冻。
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
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奖励详情：请联系区域销售经理
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