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柠檬酸钠-EDTA 抗原修复液 (40×)说明书

产品信息

产品简介

柠檬酸钠-EDTA 抗原修复液(Citrate-EDTA Antigen Retrieval Solution)是一种常用的抗原修 复液，结合了柠檬酸钠和 EDTA 进行抗原修复的优点，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使 用多聚甲醛、 甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。

细胞或组织用多聚甲醛、 甲醛或其它醛类试剂固定后，会导致蛋白之间的交联(cross-link) ，从而遮蔽样品的抗原位点，导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果。

本抗原修复液采用了常用的柠檬酸钠缓冲液和 EDTA ，结合了两者修复抗原的优点，并经过适当优化，可以更加有效地去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等 样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰 冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果，但对于冰冻 切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时，可 以考虑尝试进行抗原修复。

从原理上来看，无论冰冻切片还是细胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品，进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联，充分暴露抗原表位，从 而大大改善免疫染色效果。

本产品适用于石蜡切片，也可以用于冰冻切片等其它样品。

一个包装的本产品可以配制成 5000 毫升抗原修复液(1X)。按照每个片子需要 10 毫升抗原修复液(1X)计算，一个包装的本产品可以用于 500 个样品。

使用方法

1.  对于石蜡切片：

a.  脱蜡：切片在二甲苯中脱蜡 5 分钟，再换用新鲜的二甲苯脱蜡，共用二甲苯脱蜡 3 次。无水乙醇 5 分钟，两次。90%乙醇 5 分钟，两次，70%乙醇 5 分钟，一次。蒸馏水 5 分钟，两次。 b.  抗原修复：用重蒸水将本抗原修复液(40X)稀释 40 倍，配制成抗原修复液(1X) ，例如 1ml 本抗原修复液(40X)加入 39ml 重蒸水，混合均匀，即得 40ml 抗原修复液(1X) 。将切片浸泡在 抗原修复液(1X)中，95- 100ºC 加热约 20 分钟(加热时间可以控制在 10-30 分钟内，最佳的加热 时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索) 。抗原修复液(1X)使用前需预热到 95- 100ºC 。加 热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和 过多的水分蒸发。随后大约在 20-30 分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次，每次 3-5 分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。

2.  对于冰冻切片：用免疫染色洗涤液洗涤切片 5 分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1X)中，95- 100ºC 加热约20 分 钟(加热时间可以控制在 10-30 分钟内，最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸 索) 。抗原修复液(1X)使用前需预热到 95- 100ºC 。加热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微 波炉加热。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30 分钟 内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次，每次 3-5 分钟。随后即可进行封闭等后续的免 疫染色步骤。

3.  对于其它样品的抗原修复，可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。

注意事项

1.  本抗原修复液使用前必须用重蒸水稀释 40 倍，配制成抗原修复液(1X)。

保存条件

4ºC 保存，一年有效。

1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

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