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Tris/EDTA抗原修复液(50X)

产品信息

产品简介

EDTA 抗原修复液是一种常用的抗原修复液，可以用于石蜡切片、冰冻切片 等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。细胞或组织用多 聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，组织中的许多氨基酸残基形成醛键、羧甲 键而封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联也使抗原决定簇隐蔽。导致 免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果。因此，对于石蜡切片， 要求在进行 IHC  染色前，先进行抗原修复，即将固定时分子之间所形成的交联 破坏，恢复抗原的原有空间形态。EDTA  缓冲液是除柠檬酸缓冲液外另一种常用 的 IHC  抗原修复液。有部分抗原用 EDTA  缓冲液修复效果好于柠檬酸缓冲液。 特别是对于某些核抗原效果会更明显。

本抗原修复液采用了广泛使用的 EDTA，可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染 色效果。通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复 处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果，但对于冰冻切片的染色效 果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时，可 以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看，无论冰冻切片还是细胞爬片等，只要 是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品，进行抗原修复都会有效去除蛋 白之间的交联，充分暴露抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。

本产品可以配制成 5000ml  抗原修复液 (1×) 。按照每个玻片需要 10ml  抗原修复液 (1×) 计算，本产品可用于 500  个样本的抗原修复。

使用方法

一、石蜡切片

A  脱蜡：

(1) 浸泡在二甲苯中 3  次，每次 3~5min ，每次更换新的二甲苯。

(2) 无水乙醇脱水 2  次，每次 3~5min。

(3) 95%乙醇 3-5min。

(4) 90%乙醇 3-5min。

(5) 70%乙醇 3-5min。

(6) 蒸馏水冲洗两次，每次 3~5min。 

B  抗原修复：

(1)用去离子水或双蒸水稀释 TRIS-EDTA 抗原修复液(50×)至 1×，例如 1ml Tris-EDTA  抗原修复液 (50×) 加入 49ml  去离子水，混合均匀，即可得 1 × Tris-EDTA 抗原修复液。

(2) 抗原修复液 (1× ) 使用前需预热至 95℃。

(3) 将切片浸泡在抗原修复液 (1× ) 中，95- 100ºC  加热约 20  分钟。

C  冷却至室温后，免疫染色洗涤液洗涤 1~2  次，每次 3~5  分钟。 D  进行封闭等后续的免疫染色步骤。

二、冰冻切片

(1) 用去离子水或双蒸水稀释 TRIS-EDTA 抗原修复液 (50×) 至 1 ×。

(2) 免疫染色洗涤液洗涤切片 3~5  分钟。

(3) 将切片浸泡在抗原修复液 (1× ) 中，95℃或沸水加热约 20  分钟。

(4) 抗原修复液 (1× ) 使用前预热至 95~100℃。

(5) 冷却至室温后，免疫染色洗涤液洗涤 1~2  次，每次 3~5  分钟。

(6) 进行封闭等后续的免疫染色步骤。

注意事项

1 、  浸泡在抗原修复液 (1×) 中，最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白 自行实验。

2 、  如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。

保存条件

4℃保存，有效期一年。

1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

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