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SDS-PAGE 快速彩胶配制试剂盒说明书

Color SDS-PAGE Rapid Preparation Kit Instruction

产品信息

产品内容

产品介绍

本试剂盒适用于 Tris-甘氨酸电泳体系，其中包括 PAGE 凝胶制备所需全套试剂，只需自 备超纯水和制胶器具， 不需要额外加入 TEMED，即可制备 PAGE 凝胶。所配置的浓缩胶带有 颜色，便于上样。本试剂盒中新型促凝剂以溶液形式提供，可保证新型促凝剂溶液在 4℃稳定 保存三个月。

本试剂盒分离胶和浓缩胶缓冲液均含有 SDS ，只适用于变性凝胶电泳。

产品特色

制胶便捷： 不需计算， 短时间即可配制一块凝胶；

上层彩胶： 上层胶含有不迁移染料，可清晰辨别上样孔，使加样更加方便；

安全可靠： 无需使用 TEMED，远离恶臭气味困扰；

条带清晰： 电泳效率更高，不必因上、下层胶而改变电压，小分子量蛋白条带更清晰。

操作步骤

Ⅰ.  灌制分离胶 (以一块 0.75/1.00/1.50mm 厚的 mini 胶为例)

1.   参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。

2.   取等体积的分离胶溶液和分离胶缓冲液，各 2.0/2.7/4.0mL ，混匀。

3.   向混合溶液内加入 40/55/80μL 的新型促凝剂，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。

4.   在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液，使液面距离短玻璃板上沿约 1.5cm 即可，然后在分离 胶溶液上轻轻覆盖上一层水层，使凝胶表面保持平整。

5.   室温静置约 10-15 分钟，待分离胶和水层之间出现清晰界面后，说明胶已凝固。

Ⅱ.  灌制浓缩胶

1.   倒去覆盖在分离胶上的水层。

2.   取等体积的浓缩胶溶液和彩色浓缩胶缓冲液，各 0.5/0.75/1mL ，混匀。

3.   向混合溶液内加入 10/15/20μL 的新型促凝剂，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。

4.   将浓缩胶溶液加至分离胶的上层，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。将梳子慢慢插入凝 胶内，避免产生气泡。

5.   静置约 10-15 分钟，等待浓缩胶凝固， 将胶板放置于电泳缓冲液中，  慢慢拔出梳子，用注 射器或枪头，吸取电泳缓冲液将加样孔冲洗干净，即可进行常规电泳操作。

Ⅲ.  电泳条件

1.  使用快速电泳缓冲液 (AP1091) 进行电泳： 恒压 200-220V，约 30-35min；

2.  使用 Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液 (AP0281)：恒压 150V，约 65min； 注意事项

1.   本产品已加入 TEMED 替代品，如需进一步加速凝胶，可在配置时加入 TEMED。

2.   浓缩胶缓冲液内含有染料， 因染料本身性质， 长期静置后会产生沉淀， 使用前请轻柔混匀。

3.   凝胶速度与温度有显著的正相关性。同等条件下，温度越高，凝胶速度越快，室温过高时 建议适当减小新型促凝剂的用量；相反，如果室温较低，可适当延长凝胶时间；

4.   在配胶之前， 使胶溶液及缓冲液平衡到室温(可室温放置几分钟)，可有效避免凝胶中气泡的 形成;

附表 1. SDS-PAGE 分离胶的浓度与最佳分离范围

保存条件

本试剂盒保存于 4℃ ，其中新型促凝剂长期储存置于-20℃ ，18 个月有效。

1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

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