BCIP/NBT 碱性磷酸酶显色试剂盒
产品简介:
BCIP 和 NBT 是碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase ,ALP)的常用底物,在 ALP 的催化下,BCIP 会被水解产生强反应性的产物,该产物会和 NBT 反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的 NBT-formazan。
BCIP/NBT 碱性磷酸酶显色试剂盒(BCIP/NBT ALP Color Development Kit)可用于细胞或组织的 ALP 显色包括诱导多功能干细胞 iPS 的鉴定,也可用于 Western 等结合有 ALP 的膜的显色检测或者细胞或组织内源性的 ALP 显色。该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
名称 | XJ0701 50ml | XJ0701 100ml | Storage |
试剂(A): ALP Color Buffer | 50ml | 100ml | 4℃ |
试剂(B): BCIP Solution(300×) | 175μl | 350μl | 4℃ 避光 |
试剂(C): NBT Solution(150×) | 350μ | 700μl | 4℃ 避光 |
使用说明书 | 1份 |
自备材料:
1、 洗涤液
2、(可选)中性红染色液
操作步骤(仅供参考):
1、按照如下比例依次加入各溶液,混匀后即配制成 BCIP/NBT 染色工作液:
ALP Color Buffer | 3ml | 10ml |
BCIP Solution(300×) | 10μl | 33μl |
NBT Solution(150×) | 20μl | 67μl |
BCIP/NBT 染色工作液(总量) | 3.03m | 10.1ml |
2、对于组织切片或细胞样品或膜,在与碱性磷酸酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后,用洗涤液洗涤 3~5 次,每次 3~5min;对于检测内源性碱性磷酸酶的组织或细胞样品,固定液固定后用洗涤液洗涤 3~5 次,每次 3~5min。
3、洗涤完毕后,去除洗涤液。
4、 加入适量 BCIP/NBT 染色工作液,确保能充分覆盖样品。
5、室温避光孵育 5~30min 或更长时间(可长达 24 小时),直至显色至预期深浅。
6、去除 BCIP/NBT 染色工作液,用蒸馏水洗涤 1~2 次即可终止显色反应。
7、对于组织切片或细胞样品,显色反应终止后,如有必要可用中性红染色液染色,以便于观察;对于膜,显色反应终止后,可以室温晾干避光保存。
注意事项:
1、 BCIP 对人体有刺激性,NBT 对人体有害,请注意适当防护。
2、操作过程中,尽量避免强光照射。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12 个月有效。
本说明书由专业分子生产商雪杰特为您提供。