木质素含量测定试剂盒说明书
（货号：GF95661 微板法 48样/96样）
一、产品简介：
木质素是一种含有羟基和甲氧基的高分子芳香族化合物，是苯丙烷的衍生物，作为植物的化学成分与纤维素及半纤维素共同形成植物体骨架，大大提高了细胞壁的机械强度，为植物提供支持，适应环境，抗虫病害和抗倒伏的生理功能，同时，在木质素合成过程中产生的一些前体物质酚类和自由基可以破坏原菌相关酶类的生物活性与细胞膜的通透性，从而使植物有一定的自我防御能力。
本试剂盒采用乙酰化法，使木质素中的酚羟基发生乙酰化，其在280nm处有特征吸收峰，280nm的吸光值高低与木质素含量正相关。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称 | 规格 | 保存要求 |
试剂一 | 液体10mL×1瓶 | 4℃保存 |
试剂二 | 液体40mL×1瓶 | 4℃保存 |
试剂三 | 液体7mL×1瓶 | 4℃保存 |
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96孔板、低温离心机、水浴锅、移液器、蒸馏水、冰乙酸、丙酮。
四、木质素含量的测定：
1、样本制备：取样本烘干至恒重，过筛，备用。 2、上机检测
① 酶标仪预热30 min，设置温度在25ºC，设定波长到280nm。
②选用螺旋盖式2mL的EP管，按照下表加样：
试剂（μL） | 测定管 | 空白管 |
烘干样本（mg） | 1.5 | |
试剂一 | 100 | 100 |
沿管壁缓缓加入，充分混匀，50℃水浴2h，每隔15min震荡一次， 然后冷却至室温。 | ||
试剂二 | 400 | 400 |
试剂三 | 70 | 70 |
振荡充分混匀，加冰乙酸定容至1mL。 | ||
取200μL于96孔UV板中，测定280nm下吸光值A。分别记为A空白管和A测定管，ΔA=A测定管-A空白管。 | ||
五、结果计算：
1、标准曲线方程：y = 15.196x - 0.0022；x为标准品浓度，y为ΔA。
2、按样本干重计算：
木质素（mg /g干重）= [(ΔA＋0.0022) ÷15.196] ×V1÷W
=0.0658×(ΔA＋0.0022)÷W
V1----定容后总体积，1mL；
W----样本干重，1.5mg=1.5×10-3g。
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
本说明书由专业生化试剂盒生产商雪杰特为您提供。
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