本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：10ng/L -700ng/L
产品规格：96T
使用目的：
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中血管内皮钙粘蛋白 (VE-cadherin) 含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠血管内皮钙粘蛋白 (VE-cadherin)水平。用 纯化的小鼠血管内皮钙粘蛋白 (VE-cadherin)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加血管内皮钙粘蛋白 (VE-cadherin) ，再与 HRP 标记的血管内皮钙粘蛋白 (VE-cadherin)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显 色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅 和样品中的血管内皮钙粘蛋白 (VE-cadherin)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光 度 (OD 值) ，通过标准曲线计算样品中小鼠血管内皮钙粘蛋白 (VE-cadherin)浓度。
Beijing CHEJETER Technology Co.,Ltd.
Tel:010-82700004
Wed:www.cjt-bio.com
E-mail:finance@cjt-bio.com
小鼠血管内皮钙粘蛋白 (VE-cadherin)免疫分析试剂盒
使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：10ng/L -700ng/L
产品规格：96T
使用目的：
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中血管内皮钙粘蛋白 (VE-cadherin) 含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠血管内皮钙粘蛋白 (VE-cadherin)水平。用 纯化的小鼠血管内皮钙粘蛋白 (VE-cadherin)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加血管内皮钙粘蛋白 (VE-cadherin) ，再与 HRP 标记的血管内皮钙粘蛋白 (VE-cadherin)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显 色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅 和样品中的血管内皮钙粘蛋白 (VE-cadherin)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光 度 (OD 值) ，通过标准曲线计算样品中小鼠血管内皮钙粘蛋白 (VE-cadherin)浓度。
试剂盒组成
1 | 20 倍浓缩洗涤液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 终止液 | 3ml×1 瓶 |
2 | 酶标试剂 | 3ml×1 瓶 | 8 | 标准品 (1200ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12 孔×4 条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 样品稀释液 | 3ml×1 瓶 | 10 | 说明书 | 1 份 |
5 | 显色剂 A 液 | 3ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 张 |
6 | 显色剂 B 液 | 3ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 个 |
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的 (HRP) 活性。
操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
600ng/L | 5 号标准品 | 150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液 |
300ng/L | 4 号标准品 | 150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液 |
150ng/L | 3 号标准品 | 150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液 |
75ng/L | 2 号标准品 | 150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液 |
37.5ng/L | 1 号标准品 | 150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液 |
2.加样：分别设空白孔 (空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl，待测样品孔中先加样品稀释液 40μl， 然后再加待测样品 10μl (样品最终稀释度为 5 倍) 。加样将样品加于酶标板孔底部，尽 量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50μl ，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50μl ，再加入显色剂 B50μl ，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟。
10.终止：每孔加终止液 50μl ，终止反应 (此时蓝色立转黄色)。
11.测定：以空白孔调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度 (OD 值) 。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
操作程序总结：
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标 准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数， 即为样品的实际浓度。
注意事项
1 ．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 1 小时后方可使用，酶标包被板开封后如未用完， 板条应装入密封袋中保存。
2 ．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3 ．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4 ．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高 (样本 OD 值 大于标准品孔第一孔的OD 值) ，请先用样品稀释液稀释一定倍数 (n 倍) 后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数 ( ×n×5)。
5 ．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6 ．底物请避光保存。
7 ．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8 ．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9 ．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异， 以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1 ．试剂盒保存：2-8℃。
2 ．有效期：6 个月
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
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