产品介绍
测定意义:
TC 包括游离胆固醇和胆固醇酯。TC 是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。测定原理:
利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇(FC)和游离脂肪酸(FFA),从而把胆固醇酯转化为 FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化 FC 氧化,生成△4-胆甾烯酮和 H2O2;最后利用过氧化物酶催化 H2O2氧化 4-氨基安替比林和酚,生成红色醌类化合物;在 500nm 有特征吸收峰,其颜色深浅与 TC 含量成正比。
保存条件
2-8℃保存
Beijing CHEJETER Technology Co.,Ltd.
Tel:010-82700004
Wed:www.cjt-bio.com
E-mail:finance@cjt-bio.com
总胆固醇(TC)含量检测试剂盒说明书
产品信息
产品名称 | 产品货号 | 规格 | ||
总胆固醇(TC)含量检测试剂盒 | SH24310 | 100 管/96 样 |
产品简介
测定意义:
TC 包括游离胆固醇和胆固醇酯。TC 是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。 测定原理:
利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇 (FC) 和游离脂肪酸 (FFA),从而 把胆固醇酯转化为 FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化 FC 氧化,生成△4-胆甾 烯酮和 H2O2 ;最后利用过氧化物酶催化 H2O2 氧化 4-氨基安替比林和酚,生成 红色醌类化合物;在 500nm 有特征吸收峰,其颜色深浅与 TC 含量成正比。
产品内容
组成 | 含量 | 保存 |
试剂一 | 异丙醇 100mL (自备) | 4℃ |
TC 工作液 | 液体 20mLx1 瓶 | 4℃ |
TC 标准品 | 液体 1mLx1 支,5μmol/mL | 4℃ |
使用方法
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
需自备的仪器和用品:水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英 比色皿/96 孔板。
TC 的提取:
1 、 组织中 TC 的提取:按照组织质量 (g):试剂一体积(mL)为 1 :5~ 10 的 比例 (建议称取约 0. 1g 组织,加入 1mL 试剂一) 进行冰浴匀浆,8000g 4℃离心 10min ,取上清,即 TC 待测液。
2 、细胞、细菌中 TC 的提取:先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内,弃 上清,加 1mL 试剂一,超声波破碎 1min (强度 20%,超声 2s,停 1s),8000g 4℃离心 10min ,取上清,即 TC 待测液。
3 、血清 (浆) 等样品:直接测定。
测定操作:
1. 可见分光光度计/酶标仪预热 30 min ,调节波长到 500 nm ,蒸馏水调零。
2. TC 工作液置于 37℃水浴 30min。
3. 标准 管: 在微量石英 比色皿/96 孔板 中依 次加入 4 μL TC 标准 品和 196μLTC 工作液,迅速混匀,5min 后于 500nm 处比色,记为 A1。
4. 测 定 管: 在微量石英 比色皿/96 孔板 中依 次加入 4 μL TC 待测液和 196μLTC 工作液,迅速混匀,5min 后于 500nm 处比色,记为 A2。
注意:标准管只需要测定一次。
计算公式:
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1. 血清 (浆) 中 TC 含量计算:
TC(μ mol /dL) =C 标准液×A 测定管÷A 标准管×100 mL=500×A 测定管÷A 标
准管
C 标准液:5μmol/mL;100 mL:1dL= 100 mL。
2. 组织中 TC 含量计算:
( 1)按样本蛋白浓度计算
TC(μ mol / mg prot) = C 标准液×A 测定管÷A 标准管÷Cpr= 5×A 测定管÷A 标准管÷Cpr
(2) 按样本质量计算
TC (μ mol / g) = C 标准液×A 测定管÷A 标准管÷W
= 5×A 测定管÷A 标准管÷W
C 标准液:5μmol/mL;样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g/mL
3. 细胞、细菌中 TC 含量计算:
TC (μ mol /104cell) =C 标准液×A 测定管÷A 标准管÷细菌或细胞 (104cell /L) =5×A 测定管÷A 标准管÷细菌或细胞 (104cell /L)
C 标准液:5μmol/mL。
b.使用 96 孔板测定的计算公式如下
1. 血清 (浆) 中 TC 含量计算:
TC (μ mol /dL) =C 标准液×A 测定管÷A 标准管×100 mL=500×A 测定管÷A 标 准管
C 标准液:5μmol/mL;100 mL:1dL= 100 mL。
2. 组织中 TC 含量计算:
( 1)按样本蛋白浓度计算
TC (μ mol / mg prot) = C 标准液×A 测定管÷A 标准管÷Cpr= 5×A 测定管÷A 标准管÷Cpr
(2)按样本质量计算
TC(μ mol /g) = C 标准液×A 测定管÷A 标准管÷W= 5×A 测定管÷A 标准管÷W C 标准液:5μmol/mL;样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g/mL
3. 细胞、细菌中 TC 含量计算:
TC (μ mol /104cell) =C 标准液×A 测定管÷A 标准管÷细菌或细胞 (104cell /L)
=5×A 测定管÷A 标准管÷细菌或细胞 (104cell /L)
C 标准液:5μmol/mL。
注意事项
最低检出限为 1mmol/L。
保存条件
2-8℃保存
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
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奖励详情:请联系区域销售经理