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总胆固醇（TC）含量检测试剂盒说明书

可见分光光度法

产品信息

产品简介

测定意义：

TC  包括游离胆固醇和胆固醇酯。TC  是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。测定原理： 利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇 (FC) 和游离脂肪酸 (FFA)，从而把胆固醇酯转 化为 FC；进一步利用胆固醇氧化酶催化 FC  氧化，生成△4-胆甾烯酮和 H2O2 ；最后利用过 氧化物酶催化 H2O2 氧化 4-氨基安替比林和酚，生成红色醌类化合物；在 500nm  有特征吸收 峰，其颜色深浅与 TC  含量成正比。

产品内容

使用方法

正式测定前务必取 2-3  个预期差异较大的样本做预测定

需自备的仪器和用品：可见分光光度计、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿、异丙醇和蒸馏水。

TC 的提取：

1 、  组织中 TC  的提取：按照组织质量 (g)：试剂一体积(mL)为 1 ：5~ 10  的比例 (建议称 取约 0. 1g  组织，加入 1mL  试剂一) 进行冰浴匀浆，8000g 4℃离心 10min ，取上清，即 TC 待测液。

2 、细胞、细菌中 TC  的提取：先收集 400-500  万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加 1mL 试剂一，超声波破碎 1min  (强度 20％，超声 2s ，停 1s)，8000g 4℃离心 10min ，取上清， 即 TC  待测液。

3 、血清 (浆) 等样品：直接测定。

测定操作：

1.  分光光度计预热 30 min ，调节波长到 500 nm ，蒸馏水调零。

2. TC  工作液置于 37℃水浴 30min。

3.  标准管：在 1mL 玻璃比色皿中依次加入 20 μL TC  标准品和 980μLTC  工作液，迅速混匀， 5min  后于 500nm  处比色，记为 A 标准管。

4.  测定管：在 1mL 玻璃比色皿中依次加入 20 μL TC  待测液和 980μLTC  工作液，迅速混匀， 5min  后于 500nm  处比色，记为 A 测定管。

注意：标准管只需要测定一次。

计算公式：

1.  血清 (浆) 中 TC  含量计算：

TC  (μ mol /dL) =C  标准液×A  测定管÷A  标准管×100 mL=500×A  测定管÷A  标准管

C  标准液：5μmol/mL；100 mL：1dL= 100 mL。

2.  组织中 TC  含量计算：

(1)按样本蛋白浓度计算

TC  (μ mol / mg prot) = C  标准液×A  测定管÷A  标准管÷Cpr= 5×A  测定管÷A  标准管÷Cpr

(2) 按样本质量计算

TC  (μ mol / g) = C  标准液×A  测定管÷A  标准管÷W

= 5×A  测定管÷A  标准管÷W

C  标准液：5μmol/mL；样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g/mL

3.  细胞、细菌中 TC  含量计算：

TC  (μ mol /104cell) =C  标准液×A  测定管÷A  标准管÷细菌或细胞 (104cell /L) =5×A  测定管 ÷A  标准管÷细菌或细胞 (104cell /L)

C  标准液：5μmol/mL。

注意事项

最低检出限为 1mmol/L。

保存条件

2-8℃保存

1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

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