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甘油三酯(TG)含量检测试剂盒  微量法

品牌:CHEJETER | 货号:SH29210

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SH29210-96T CHEJETER 96T 530.00
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产品介绍

测定意义:

TG 是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。

测定原理: 

用异丙醇抽提取 TG,KOH 皂化 TG 后水解生成甘油及脂肪酸,过碘酸氧化甘油生成甲醛,在氯离子存在下甲醛与乙酷丙酮缩合生成黄色物质,在 420 mm 有特征吸收峰,其颜色的深浅与TG含量成正比。

保存条件

2-8℃保存


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Beijing CHEJETER Technology Co.,Ltd.

Tel:010-82700004

Wed:www.cjt-bio.com

E-mail:finance@cjt-bio.com


甘油三酯(TG)含量检测试剂盒说明书

微量法

产品信息

产品名称  产品货号规格
甘油三酯(TG)含量检测试剂盒 SH29210100 管/96 样

产品简介

TG  是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要 呼吸底物。

测定原理:  用异丙醇抽提取 TG, KOH  皂化 TG  后水解生成甘油及脂肪酸,过碘 酸氧化甘油生成甲醛,在氯离子存在下甲醛与乙酷丙酮缩合生成黄色物质,在 420 mm  有特征吸收峰,其颜色的深浅与 TG 含量成正比。

产品内容

含量

试剂

x2

4℃

试剂

x1

4℃

试剂

x1

4℃

试剂

x1

4避光

试剂

x1

4避光

试剂

x1

4避光

准品

x1 支,1mg/mL  标准 油三酯溶液

4℃

使用方法

正式测定前务必取 2-3  个预期差异较大的样本做预测定

需自备的仪器和用品:可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96  孔板、水浴锅、 可调式移液枪、双蒸水

TG 的提取:

1 、组织中 TG  的提取:按照组织质量 (g):试剂一体积(mL)为 1 :5~ 10  的比 例 (建议称取约 0. 1g  组织,加入 1mL  试剂一) 进行冰浴匀浆,8000g ,4℃离 心 10min ,取上清,即 TG 待测液。

2 、细胞、细菌中 TG  的提取:先收集 400-500  万细胞或细菌到离心管内,弃 上清,加 1mL 试剂一,超声波破碎 1min (强度 20%,超声 2s,停 1s),8000g, 4℃离心 10min ,取上清,即 TG  待测液。

3 、血清 (浆) 样品:直接测定。 

测定操作:

1. 可见分光光度计/酶标仪预热 30min ,调节波长到 420 nm ,蒸馏水调零。 2. 水浴锅预热到 65℃。

剂名称μL

白管

准管

定管

双蒸

10



1mg/ml 标准


10


TG 待测液



10

试剂

125

125

125

试剂

25

25

25

加试剂一后分混匀,再加试剂二,剧烈振荡 30s,静置,待分层后取上层溶液 15μL ,置于新的 EP 管中。

3. 甘油三酯含量测定

剂名称μL

白管

准管

定管

上层溶液

15

15

15

试剂

50

50

50

试剂

15

15

15

充分匀,65℃水浴 3min

试剂

50

50

50

试剂

50

50

50

充分混匀,65℃水浴 15min

待冷却后,置于微量石英比色皿/96  孔板测定 420nm  处吸光值,记为 A  空, A  标和 A  测。

注意:空白管和标准管只需测定一次。

计算公式:

a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下

1.  血清 (浆) 中甘油三酯含量计算:

TG  含量 (mg/dL) =C  标准品×  (A  测-A  空) ÷  (A  标-A  空) ×100 mL = 100×  (A  测-A  空) ÷  (A  标-A  空)

C  标准品:1mg/mL;100mL:血清体积,1dL= 100 mL。

2.  组织中甘油三酯含量计算:

( 1)按样本蛋白浓度计算

TG  含量 (mg/ mg prot) = C  标准品×  (A  测-A  空) ÷  (A  标-A  空) ÷Cpr =  (A  测-A  空) ÷  (A  标-A  空) ÷ Cpr

(2)按样本质量计算

TG  含量 (mg/ g) =C  标准品×  (A  测-A  空) ÷  (A  标-A  空) ÷W =  (A  测-A  空) ÷  (A  标-A  空) ÷ W

C  标准品:1mg/mL  ;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g/mL

3.  细胞、细菌中甘油三酯含量计算:

TG  含量 (mg/ 104cell) =C  标准品×  (A  测-A  空) ÷  (A  标-A  空) ÷细菌或细胞 (104cell /L) 

=  (A  测-A  空) ÷  (A  标-A  空) ÷细菌或细胞 (104cell /L)

C  标准品:1mg/mL。

b.使用 96  孔板测定的计算公式如下

1.  血清 (浆) 中甘油三酯含量计算:

TG  含量 (mg/dL) =C  标准品×  (A  测-A  空) ÷  (A  标-A  空) ×100 mL 

= 100×  (A  测-A  空) ÷  (A  标-A  空)

C  标准品:1mg/mL;100mL:血清体积,1dL= 100 mL。

2.  组织中甘油三酯含量计算:

( 1)按样本蛋白浓度计算

TG  含量 (mg/ mg prot) = C  标准品×  (A  测-A  空) ÷  (A  标-A  空) ÷Cpr 

=  (A  测-A  空) ÷  (A  标-A  空) ÷ Cpr

(2)按样本质量计算

TG  含量 (mg/ g) =C  标准品×  (A  测-A  空) ÷  (A  标-A  空) ÷W 

=  (A  测-A  空) ÷  (A  标-A  空) ÷ W

C  标准品:1mg/mL  ;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g/mL

3.  细胞、细菌中甘油三酯含量计算:

TG  含量 (mg/ 104cell) =C  标准品×  (A  测-A  空) ÷  (A  标-A  空) ÷细菌或细胞 (104cell /L)

=  (A  测-A  空) ÷  (A  标-A  空) ÷细菌或细胞 (104cell /L)

C  标准品:1mg/mL。

注意事项

1.试剂盒中有易挥发性物质,实验过程中需佩戴手套和口罩,试剂瓶盖打开后应 该及时盖紧。

2.加试剂二后需剧烈震荡,使待测液中甘油三酯得到充分提取。

3 最低检出限为 100μmol/L。

保存条件

2-8℃保存


1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

3.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。


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