产品介绍
测定意义:
GSH/GSSG 是细胞内最重要的氧化还原对之一。因此,测定细胞内 GSH 和 GSSG 含量以及GSH/GSSG 比值,能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态,也是谷胱甘肽氧化还原循环的主要指标之一。
测定原理:
利用 2-VP 法测 GSSG 含量。
保存条件保存条件
2℃-8℃保存
Beijing CHEJETER Technology Co.,Ltd.
Tel:010-82700004
Wed:www.cjt-bio.com
E-mail:finance@cjt-bio.com
氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量测试盒说明书
(可见光分光光度法)
产品信息
产品名称 | 产品货号 | 规格 | ||
氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量测试盒 | SH22110 | 50 管/48 样 |
产品简介
测定意义:
GSH/GSSG 是细胞内最重要的氧化还原对之一。因此,测定细胞内 GSH 和GSSG 含量以及 GSH/GSSG 比值,能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态,也是谷胱甘肽氧化还原循环的主要指标之一。
测定原理:
利用 2-VP 法测 GSSG 含量。
产品内容
组成 | 含量 | 保存 |
试剂一 | 液体x1 瓶 | 4℃ |
试剂二 | 液体x1 瓶 | 4℃ |
试剂三 | 液体x1 瓶 | 4℃ |
试剂四 | 液体x1 瓶 | 4℃ |
试剂五 | 粉剂x1 瓶 | 4℃ 临用前加入 5 mL 蒸馏水溶解,4℃保存 |
试剂六 | 液体x1 瓶 | 4℃ 临用前加入 0.5 mL 蒸馏水稀释,4℃保存 |
标准品 | 液体x1 瓶 3μmol/mL GSSG |
4℃ |
使用方法
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
需自备的仪器和用品:可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
粗酶液提取:
1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~ 10 的比例(建议称取 约 0. 1g 组织,加入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min ,取 上清液(如上清不清澈,再离心 3min)100μL ,加 900μL 的蒸馏水混匀待测。
2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):试剂一体积(mL)为 500~ 1000:1 的 比例(建议 500 万细胞加入 1mL 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w, 超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);8000g 4℃离心 10min ,取上清液(如上清不清澈,再离心 3min)100μL ,加 900μL 的蒸馏水混匀待测。
3. 血清等液体:直接测定。
测定操作:
1. 分光光度计预热 30 min ,调节波长到 412 nm ,蒸馏水调零。
2. 试剂三置于 25℃( 一般物种)或者 37℃(哺乳动物)水浴中保温 30min 。
3. 标准管:取 1 mL EP 管,加入 100 μ L 标准液,2 μ L 试剂二,盖紧后混匀, 置于 37℃水浴 30min;开盖后依次加入 700μ L 试剂三,100 μ L 试剂四,100 μ L 试剂五,10 μ L 试剂六,迅速混匀后,测定 30 s 和 150 s 光吸收 A1 和 A2。
4. 测定管:取 1 mL EP 管,加入 100 μ L 上清液,2 μ L 试剂二,盖紧后混匀, 置于 37℃水浴 30min;开盖后依次加入 700μ L 试剂三,100 μ L 试剂四,100μ L 试剂五,10 μ L 试剂六,迅速混匀后,测定 30 s 和 150 s 光吸收 A3 和 A4。
注意:标准管只需要测定一次。
GSSG 含量计算公式:
(1). 按蛋白浓度计算
GSSG(μmol/mg prot)=C 标准液×(A4-A3)÷(A2-A1)×V 反总÷(V 样×Cpr)=30.36×(A4-A3)÷(A2-A1)÷Cpr
(2). 按样本质量计算
GSSG(μmol/g)=C 标准液×(A4-A3)÷(A2-A1)×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)=30.36×(A4-A3)÷(A2-A1)÷W
(3). 按细胞数量计算
GSSG(μmol/104cell)=C 标准液×(A4-A3)÷(A2-A1)×V 反总÷(V 样÷V 样 总×细胞数量)=30.36×(A4-A3)÷(A2-A1)÷细胞数量
(4). 按照液体体积计算
GSSG(μmol/mL)=C 标准液×(A4-A3)÷(A2-A1)×V 反总÷V 样=30.36×(A4-A3)÷(A2-A1)
C 标准液:3μmol/mL GSSG;V 反总:反应总体积,1.012mL;V 样:反应中加入样本体积,0. 1mL;V 样总:加入提取液体积,1mL;W:样品质量,g,Cpr:样本蛋白浓度(mg/mL)
注意事项
1. 提取过程中去掉蛋白质,所以提取液不能用于测定蛋白含量。
2. 临用前配制的试剂配好后 4℃保存,3 天内使用完毕。
3. 最低检出限为 1mmol/L。
保存条件
2℃-8℃保存
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
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奖励详情:请联系区域销售经理