产品介绍
测定意义：
GSH 是细胞内最主要的抗氧化巯基物质，在抗氧化、蛋白质巯基保护和氨基酸跨膜运输等中具有重要作用。还原型与氧化型比值（GSH/GSSG）是细胞氧化还原状态的主要动态指标。因此，测定细胞内 GSH 和 GSSG 含量以及 GSH/GSSG 比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。
测定原理：
DTNB 与 GSH 反应生成复合物，在 412nm 处有特征吸收峰；其吸光度与 GSH 含量成正比。
保存条件
2℃-8℃保存
Beijing CHEJETER Technology Co.,Ltd.
Tel:010-82700004
Wed:www.cjt-bio.com
E-mail:finance@cjt-bio.com
还原型谷胱甘肽（GSH）测试盒说明书
（微量法）
产品信息
| 产品名称 | 产品货号 | 规格 | ||
| 还原型谷胱甘肽（GSH）测试盒 | SH21110 | 100 管/96 样 | ||
产品简介
测定意义：
GSH 是细胞内最主要的抗氧化巯基物质，在抗氧化、蛋白质巯基保护和氨基酸跨膜运输等中具有重要作用。还原型与氧化型比值（GSH/GSSG）是细胞氧化还原状态的主要动态指标。因此，测定细胞内 GSH 和 GSSG 含量以及
GSH/GSSG 比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。
测定原理：
DTNB 与 GSH 反应生成复合物，在 412nm 处有特征吸收峰；其吸光度与 GSH含量成正比。
产品内容
组成 | 含量 | 保存 |
试剂一 | 液体x1 瓶 | 4℃ |
试剂二 | 液体x1 瓶 | 4℃ |
试剂三 | 液体x1 瓶 | 4℃避光 |
使用方法
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
需自备的仪器和用品：低温离心机、水浴锅、可调节移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、和蒸馏水。
粗酶液提取：
1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~ 10 的比例（建议称取约 0. 1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌：按照细胞数量（104 个）：试剂一体积（mL）为 500~ 1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w， 超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 8000g ，4℃ , 离心 10min ，取上清置于冰上待测。
3. 血清等液体：直接测定。
测定步骤：
1. 分光光度计/酶标仪预热 30min ，调节波长到 412 nm ，蒸馏水调零。
2. 试剂二置于 25℃（ 一般物种）或者 37℃（哺乳动物）水浴中保温 30min。
3. 空白管：取微量玻璃比色皿或 96 孔板，依次加入 20μL 蒸馏水，140μL 试剂二，40μL 试剂三，混匀静置 2min 后测定 412 nm 吸光度 A1。
4. 测定管：取微量玻璃比色皿或 96 孔板，依次加入 20μL 上清液，140μL 试剂二，40μL 试剂三，混匀静置 2min 后测定 412 nm 吸光度 A2。
注意：空白管只需要测定一次。
GSH 含量计算公式：
GSH 标准曲线公式：y= 1.5 x（x 为 GSH 浓度，μ mol /mL；y 为吸光值）
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下
（1）按蛋白浓度计算
GSH(μ mol/ mg prot）=(A2－A1) ÷ 1.5 ×V 反总÷V 样÷Cpr =6.67×(A2－A1) ÷Cpr
（2）按样本质量计算
GSH(μ mol/g）=(A2－A1) ÷ 1.5 ×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)=6.67×(A2－A1) ÷W
（3）按细胞数量计算
GSH (μ mol /104 cell ）=(A2 －A1) ÷ 1.5 ×V 反 总 ÷(V 样 ÷V 样 总 × 细 胞 数 量)=6.67×(A2－A1) ÷细胞数量
（4）按液体体积计算
GSH(μ mol/ mL）=(A2－A1) ÷ 1.5 ×V 反总÷V 样 =6.67×(A2－A1)
V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样总：上清液总体积，1 mL；V 样：加入反
应体系中上清液体积，20μL=0.02 mL；Cpr：上清液蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量
b.使用 96 孔板测定的计算公式如下
GSH 标准曲线公式：y=0.75x（x 为 GSH 浓度，μ mol /mL；y 为吸光值）
（1）按蛋白浓度计算
GSH(μ mol/ mg prot）=(A2－A1) ÷0.75×V 反总÷V 样÷Cpr = 13.34×(A2－A1)÷Cpr
（2）按样本质量计算
GSH(μ mol/g）=(A2－A1) ÷0.75×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)=13.34×(A2－A1)÷W
（3）按细胞数量计算
GSH (μ mol /104cell ）=(A2 －A1) ÷0.75×V 反 总 ÷(V 样 ÷V 样 总 × 细 胞数量)=13.34×(A2－A1) ÷细胞数量
（4）按液体体积计算
GSH(μ mol/ mL）=(A2－A1) ÷0.75×V 反总÷V 样 =6.67×(A2－A1)
V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样总：上清液总体积，1mL；V 样：加入反 应体系中上清液体积，20μL=0.02 mL；Cpr：上清液蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量
注意事项
1. 试剂一中含有蛋白质沉淀剂，因此上清液不能用于蛋白浓度测定。
2. 最低检出限为 1mmol/L。
保存条件
2℃-8℃保存
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
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奖励详情：请联系区域销售经理
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