Beijing CHEJETER Technology Co.,Ltd.

Tel:010-82700004

Wed:www.cjt-bio.com

E-mail:finance@cjt-bio.com

还原型谷胱甘肽（GSH）测试盒说明书

（可见光分光光度法）

产品信息

产品简介

测定意义：

GSH  是细胞内最主要的抗氧化巯基物质，在抗氧化、蛋白质巯基保护和氨基酸 跨膜运输等中具有重要作用。还原型与氧化型比值（GSH/GSSG）是细胞氧化还原状态 的主要动态 指标 。 因此 ，测 定细胞 内 GSH  和 GSSG  含量 以及GSH/GSSG  比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。

测定原理：

DTNB  与 GSH  反应生成复合物，在 412nm  处有特征吸收峰；其吸光度与 GSH含量成正比。

产品内容

使用方法

正式测定前务必取 2-3  个预期差异较大的样本做预测定

需自备的仪器和用品：低温离心机、水浴锅、可调节移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96  孔板、和蒸馏水。

粗酶液提取：

1.  组织：称取约 0. 1g  组织，加入 1mL  试剂 A 进行冰浴匀浆。8000g ，4℃离心 10min ，取上清置冰上待测。

2.  细菌、真菌：500  万细胞加入 1mL  试剂一，冰浴超声波破碎细胞（功率 300w， 超声 3  秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 8000g ，4℃ , 离心 10min ，取上清置于冰上待测。

3.  血清等液体：直接测定。

测定步骤：

1.  按照分光光度计说明书，充分预热，待机器稳定后使用，调节波长到 412 nm，蒸馏水调零。

2.  试剂二置于 25℃（ 一般物种）或者 37℃（哺乳动物）水浴中保温 30min。 

3.  空白管：取 1mL  玻璃比色皿，依次加入 100μL    蒸馏水，700μL  试剂二，200μL  试剂三，混匀静置 2min  后测定 412 nm  吸光度 A1。

4.  测定管：取 1mL  玻璃比色皿，依次加入 100μL    上清液，700μL  试剂二，200μL  试剂三，混匀静置 2min  后测定 412 nm  吸光度 A2。

注意：空白管只需要测定一次。

GSH 含量计算公式：

GSH  标准曲线公式：y= 1.5 x（x  为 GSH  浓度，μ mol /mL；y  为吸光值）

GSH  计算：

（1）按蛋白浓度计算

GSH(μ mol/ mg prot）=(A2－A1) ÷ 1.5 ×V  反总÷V  样÷Cpr =6.67×(A2－A1) ÷Cpr

（2）按样本质量计算

GSH(μ mol/g）=(A2－A1) ÷ 1.5 ×V  反总÷(V  样÷V  样总×W)=6.67×(A2－A1) ÷W

（3）按细胞数量计算

GSH  (μ mol /10 4    cell） =(A2－A1) ÷ 1.5 ×V  反总÷(V  样÷V  样总 × 细胞数 量)=6.67×(A2－A1) ÷细胞数量

（4）按液体体积计算

GSH(μ mol/ mL）=(A2－A1) ÷ 1.5 ×V  反总÷V  样 =6.67×(A2－A1)

V  反总：反应总体积，1mL；V  样总：上清液总体积，1 mL；V  样：加入反应

体系中上清液体积，100μL=0. 1 mL；W：样品质量，g  ；Cpr：上清液蛋白质浓度，mg/mL；

注意事项

1.  试剂一中含有蛋白质沉淀剂，因此上清液不能用于蛋白浓度测定。

2.  最低检出限为 1mmol/L。

保存条件

2℃-8℃保存

1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

暂时没有相关论文及文献，热烈欢迎各位同学大佬前来投稿，提交论文申请论文奖励。

                                                                              奖励详情：请联系区域销售经理